树突状细胞（dendritic cell，DC）是当前已知的功能最强的抗原递呈细胞（APC）。一个DC能激活多达100-3000个T细胞，远超巨噬细胞和B细胞的能力。DC通过处理肿瘤抗原并将其递呈给T细胞，显著促进初始T细胞的增殖，而其他类型的APC（如巨噬细胞和B细胞）只能刺激已经活化或具备记忆的T细胞。

目前，DC的体外培养主要是通过细胞因子从骨髓、外周血和脐带血的DC前体定向诱导。由于骨髓和脐带血取样困难，外周血的采集相对简单，且无需复杂的筛选和纯化过程，因此成为临床获得DC的理想选择。

以GM-CSF与IL-4的组合可促进单核细胞向“大巨噬样细胞”的分化，并抑制DC前体向CD14+巨噬细胞转化，从而形成CD14-/CD1a-的初始DC（iDC）。在此阶段，iDC对抗原的摄取和加工能力较强，但递呈能力较弱，细胞表面中等表达MHCⅠ、Ⅱ类分子和B7家族分子（如CD80、CD86），而CD14的表达则相对较低。

在成熟过程中，TNF-α和IL-1β通过激活NF-κB信号通路，促进DC的成熟（标志为CD1a+/CD83+）。这两种细胞因子的协同作用显著增强了MHCⅡ类分子及共刺激分子的表达。同时，IL-6和PGE2的加入可增强DC的增殖、成熟、迁移能力及免疫激活能力，尤其是迁移能力。成熟DC（mDC）在抗原的摄取和加工能力上有所降低，但其抗原递呈能力显著增强，能够强力激活T细胞。

在细胞培养过程中，通过Ficoll梯度离心法从全血中分离出人外周血单个核细胞（PBMC），随后使用贴壁法或磁珠法富集CD14+单核细胞。贴壁法结合细胞培养，可有效去除悬浮的淋巴细胞。培养的第3天需要进行半量换液，以促进细胞的继续生长。最后，依据细胞的表面标志（如CD14、HLA-DR、CD1a/CD83等）利用流式细胞术分析DC的成熟状态和功能特征。

对于人类DC的研究，除了IL-6、TNF-α和MCP-1外，还需检测IL-12p70、IL-10和IL-1β，以全面反映其免疫调节功能。而小鼠DC通常监测IL-6、TNF-α和MCP-1，主要反映其炎症反应和趋化能力。MLR实验基于DC对T细胞的激活能力，通过检测T细胞的增殖反应来评估免疫应答的强度。

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